Kurz & knapp
Eine Zählkammer ist ein dicker Objektträger mit eingraviertem Liniennetz, der ein genau bekanntes Flüssigkeitsvolumen abgrenzt. Zählst Du darin Zellen oder Partikel, kannst Du ihre Konzentration berechnen; die Neubauer-Kammer ist die verbreitetste Bauform.
Inhalt
Die Zählkammer, in der Medizin auch Hämozytometer genannt, ist zwar ein Laborgerät, wird aber auch von Hobby-Mikroskopikern etwa für Hefe oder Algen genutzt. Sie verwandelt die Frage „Wie viele sind es?“ in eine einfache Rechnung.
Aufbau der Neubauer-Kammer
Die Grundplatte hat die Größe eines normalen Objektträgers (76 × 26 mm), ist aber etwa 5 mm dick. In der Mitte liegt ein Steg, der 0,1 mm tiefer liegt als die Auflagestege links und rechts. Legst Du das spezielle, plangeschliffene Deckglas auf, entsteht ein Zwischenraum von 0,1 mm Tiefe. Das Gitter besteht aus 3 × 3 Großquadraten von je 1 mm Kantenlänge, also 1 mm² Fläche. Jedes Großquadrat fasst somit 0,1 mm³, das sind 0,1 Mikroliter.
Das mittlere Großquadrat ist in 25 Gruppenquadrate mit je 0,2 mm Kantenlänge unterteilt. Jedes davon enthält 16 Kleinstquadrate mit 0,05 mm Kantenlänge. Die Deckgläser der Kammer sind 0,4 mm dick, damit Kapillarkräfte sie nicht durchbiegen.
So zählst Du
- Reinige Kammer und Deckglas und schiebe das Glas auf die Auflagestege, bis Interferenzfarben zu sehen sind.
- Pipettiere die Probe seitlich an den Rand. Sie wird per Kapillarkraft in den Spalt gezogen.
- Zähle bei kleiner bis mittlerer Vergrößerung die Zellen in mehreren Quadraten.
- Zähle nur Zellen auf zwei Grenzlinien mit (zum Beispiel oben und links), damit nichts doppelt erfasst wird.
- Bilde den Mittelwert und rechne ihn auf das Volumen um.
Ein Rechenbeispiel
Du zählst in vier Großquadraten insgesamt 100 Hefezellen. Im Mittel sind das 25 pro Großquadrat. Ein Großquadrat fasst 0,1 µl, also entspricht der Wert 250 Zellen pro Mikroliter oder 250.000 pro Milliliter. Hast Du die Probe zuvor 1:10 verdünnt, multiplizierst Du mit 10 und kommst auf 2,5 Millionen Zellen pro Milliliter.
Wofür Hobby-Anwender sie nutzen
Typische Einsatzfälle sind Hefekulturen beim Brauen und Backen, Algenwasser aus dem Aquarium oder Teich und Pollenproben. Weil die Kammer nur 0,1 mm tief ist, passen Organismen ab etwa 100 Mikrometern nicht hinein; für Pantoffeltierchen und andere große Einzeller ist sie nicht gedacht. Willst Du solche Tiere zählen, gelingt das besser im Tropfen bei kleiner Vergrößerung. Bakterien sind dagegen so klein, dass sie sich mit Hobbygeräten kaum zuverlässig zählen lassen.
Tipp: Verdünne so, dass pro kleinem Quadrat etwa eine Zelle liegt. Zu dichte Suspension lässt sich nicht verlässlich zählen, zu dünne liefert eine große Streuung.
Die Kammer ist robust, solltest Du aber nach Gebrauch mit einem fusselfreien Tuch und etwas Isopropanol reinigen. Das Deckglas ist teurer als ein normales und bricht leicht. Für das Auszählen reicht ein Standard-Objektiv mit 10- bis 40-facher Vergrößerung.
Verwandte Begriffe
Ein geeignetes Gerät für solche Zählungen findest Du im Vergleich der Lichtmikroskope.
Häufige Fragen
Wofür braucht man eine Zählkammer?
Um die Anzahl von Zellen, Hefen, Algen oder Partikeln in einer Flüssigkeit zu bestimmen. Aus der gezählten Anzahl und dem bekannten Kammervolumen ergibt sich die Konzentration.
Wie tief ist eine Neubauer-Zählkammer?
Meist 0,1 mm. Für sehr kleine Partikel wie Bakterien gibt es Kammern mit nur 0,02 mm Tiefe.
Warum zählt man nur an zwei Rändern mit?
Zellen auf den Grenzlinien würden sonst doppelt gezählt, nämlich in beiden angrenzenden Quadraten. Die Zwei-Linien-Regel vermeidet das.
Quellen
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